Амидаза (AMD)
Ферментүүд:Макромолекул биологийн катализаторууд бөгөөд ихэнх ферментүүд нь уураг юм
Амидаза:Ацил бүлгийг усанд шилжүүлж чөлөөт хүчил ба аммиак үүсгэснээр янз бүрийн эндоген ба гадаад алифатик ба ароматик амидын гидролизийг хурдасгана. Гидроксамийн хүчил болон бусад органик хүчлүүд нь өсөлтийн хүчин зүйл, антибиотик болон хавдрын дарангуйлагчийн бүрэлдэхүүн хэсэг тул эм болгон өргөн хэрэглэгддэг. Амидазуудыг катализаторын стереоселектив чанараар нь R төрлийн ба S төрлийн ацилаз гэж хувааж болно.
Амидаза нь амидын гидролизийг хурдасгахаас гадна гидроксиламин зэрэг хам-субстратуудын дэргэд ацил дамжуулах урвалыг хурдасгаж чаддаг.
Өөр өөр эх үүсвэртэй амидаза нь өөр өөр субстратын өвөрмөц чанартай байдаг бөгөөд зарим нь зөвхөн ароматик амидуудыг гидролизжүүлдэг, зарим нь зөвхөн алифатик амидуудыг гидролизжүүлдэг, зарим нь α-эсвэл ω-амино амидуудыг гидролизжүүлдэг. Ихэнх аминууд нь зөвхөн ацикл эсвэл энгийн ароматик амидуудад сайн каталитик идэвхжилтэй байдаг бол нарийн төвөгтэй ароматикуудын хувьд гетероцикл амидууд, ялангуяа орто орлуулагчтай амидууд ерөнхийдөө бага идэвхжилтэй байдаг (цөөн хэдэн ферментүүд илүү сайн каталитик нөлөө үзүүлдэг).
Каталитик механизм:
| Ферментүүд | Бүтээгдэхүүний код | Бүтээгдэхүүний код |
| Ферментийн нунтаг | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | 19 амидазын багц, тус бүр 50 мг, 19 зүйл * 50 мг / зүйл, эсвэл бусад тоо хэмжээ |
| Шалгалтын хэрэгсэл (SynKit) | ES-AMD-1900 | 19 амидазын багц, тус бүр 1 мг, 19 зүйл * 1мг / зүйл |
★ Субстратын өндөр өвөрмөц чанар.
★ Хүчтэй хирал сонгомол чанар.
★ Өндөр хөрвүүлэлтийн үр ашиг.
★ Бага дайвар бүтээгдэхүүн.
★ Бага зэргийн урвалын нөхцөл байдал.
★ Байгальд ээлтэй.
➢ Субстратын өвөрмөц байдлаас шалтгаалан тодорхой субстратуудад ферментийн скрининг хийх шаардлагатай бөгөөд хамгийн сайн каталитик нөлөө бүхий зорилтот субстратыг катализжуулдаг ферментийг авах хэрэгтэй.
➢ Өндөр температур, өндөр/бага рН болон өндөр концентрацитай органик уусгагч зэрэг онцгой нөхцөлд хэзээ ч хүрч болохгүй.
➢ Ердийн үед урвалын систем нь субстрат, буфер уусмал (ферментийн оновчтой урвалын рН)-ийг агуулсан байх ёстой. Гидроксиламин зэрэг хам субстратууд нь ацил дамжуулах урвалын системд байх ёстой.
➢ AMD-г хамгийн сүүлд хамгийн тохиромжтой урвалын рН болон температуртай урвалын системд нэмэх хэрэгтэй.
➢ Бүх төрлийн AMD нь янз бүрийн оновчтой урвалын нөхцөлтэй байдаг тул тэдгээрийг тус бүрээр нь цаашид судлах хэрэгтэй.
Жишээ 1(1):
Амидын янз бүрийн субстратуудад гидролизийн идэвхжил
| Субстрат | Тодорхой үйл ажиллагаа мкмолс мин-1mg-1 | Субстрат | Тодорхой үйл ажиллагаа мкмолс мин-1mg-1 |
| Ацетамид | 3.8 | ο-OH бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3.9 | p-OH бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12.8 | ο-NH2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11.9 | p-NH2бензамид | 0.8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0.3 |
| Пентанамид | 22.0 | p-Толуамид | 8.1 |
| Гексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
| Циклогексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
| Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3.5 | 3-Фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
| Бензамид | 6.8 |
Урвалыг 70°C температурт рН 7.5 бүхий 50мМ натрийн фосфатын буфер уусмалд явуулсан.
| Амидууд | Гидроксиламин | Гидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Урвалыг 70°C температурт рН 7.5 бүхий 50мМ натрийн фосфатын буфер уусмалд явуулсан.
Холбогдох урвалжийн концентраци: амид, 100 мМ (бензамид, 10 мМ); гидроксиламин ба гидразин, 400 мМ; фермент 0.9 μM.
Жишээ 2(2):
Жишээ 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Гуо ФМ, Ву ЖП, Ян ЛР, нар. Процессын биохими, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Жэн РК, Жин ЖК, Ву ЗМ, нар. Биоорганик хими, 2017, Онлайнаар авах боломжтой 7.
